實時熒光PCR試劑盒是對緩沖液系統(tǒng)進行優(yōu)化使反轉(zhuǎn)錄酶和聚合酶同時發(fā)揮大功效,具有方便、快速、靈敏度高、重復(fù)性好等特點。該試劑盒能以動物、植物和微生物的總RNA或mRNA為模板,cDNA合成和PCR反應(yīng)在一個管中進行,逆轉(zhuǎn)錄結(jié)束后可直接進行PCR循環(huán)而不用增加額外的步驟;同時可對低至1fg的總RNA進行擴增,有助于大量樣品的處理并減少污染。
在實時熒光PCR試劑盒中一般有3次加樣步驟,即加標本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時應(yīng)將所加物加在實時熒光PCR試劑盒板孔的底部,防止加在孔壁上部,并注意不行濺出,不行產(chǎn)生氣泡。加標本一般用微量加樣器,按規(guī)則的量參加板孔中。每次加標本應(yīng)更換吸嘴,以免發(fā)作交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。
對于我們購買回來的實時熒光PCR試劑盒儲存及有效期,相信大家都是根據(jù)盒子上的日期決定它的有效期的,但是如果我們實驗開封過的試劑盒,怎么確定它有多久的有效期呢?這點可能很多人不知道該如何保存。不用擔心,我司為您詳細解析關(guān)于實時熒光PCR試劑盒的儲存于有效期多久。
根據(jù)我司規(guī)定未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將標準品、檢測溶液A、檢測溶液B以及96孔板保存于-20℃。
在使用后的實時熒光PCR試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
溫馨提示:實時熒光PCR試劑盒內(nèi)酶標條可拆卸,按實驗需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在實驗后1個月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時間以盒子上的標簽為準,保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。
在實時熒光PCR試劑盒實驗室,對試劑準備一般不太注意,通常的做法是,在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題,其直接的后果是對一些弱陽性標本的檢測出現(xiàn)假陰性。